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        胎牛血清如何規(guī)范化溶解

        2017-07-05 瀏覽次數(shù):1671

          胎牛血清加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活血清。
          胎牛血清經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或*沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。
          1、胎牛血清說明
          1)將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱12-24小時(shí)左右使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
          2)切勿將剛剛從-20℃冰箱里拿出來的血清直接放在水浴中,無論室溫的水或者37℃的水,因?yàn)樵谒≈醒逖杆偃刍艽蟮臏夭睿?20℃到37℃,溫差為57℃)極其容易造成血清產(chǎn)生沉淀。
          3)直接放65℃水浴中更是極其殘忍的做法,是對血清的褻玩,對科學(xué)規(guī)則的粗暴踐踏!
          4)血清應(yīng)該在-10℃以下保存。若一次無法用完一瓶,應(yīng)該無菌分裝,再冷凍保存。
          2.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?
          1)若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起培養(yǎng)。
          2)我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過濾膜。

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