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小鼠白介素 ELISA試劑盒
名稱 小鼠白介素 ELISA試劑盒
型號
報價
特點 產品名稱:小鼠白介素 ELISA試劑盒
產品規格:48T、96T
產品產地:上海
適用范圍:僅供科研
庫存:現貨
保存及有效期:2-8℃,六個月}
  • 詳細內容

產品名稱:小鼠白介素 ELISA試劑盒

ELISA的基本原理是:

①使抗原(或抗體)結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性;


②使抗原(或抗體)與某種酶聯結成酶標 抗原(或抗體),而且此酶標抗原(或抗體)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;


③測定時將受檢標本(抗體或抗原)和酶標抗原(或 抗體)按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進行反應,再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其它物質分開,最后結合 在固相載體上的酶量與標本中受檢的抗體或抗原量成一定比例;再加入酶反應底物后,底物被酶催化后變為有色產物,根據其顏色反應的 深淺進行定性或定量分析,以了解被測標本中抗體或抗原含量。


ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在中 除正常反應外,有時??梢姷揭恍╁e誤結果(即假陽性或假陰性結果)。引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:①標本因素;②試 劑因素;③操作因素。本文就標本因素對ELISA測定的影響做如下討論。 血清是常用的ELISA標本,血漿一般可視為與血清同等的標本,標本引起的假陽性和假陰性結果主要是干擾性物質所致,分為內源 性物質和外源性物質兩種。


樣品收集、處理及保存方法

1.  血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

3.  細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。


自備物品

1.酶標儀(450nm)

2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒溫箱


操作注意事項

1.  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F象,水浴加熱使結晶*溶解后再使用。

2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

3.  濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍,最終結果乘以5才是樣本實際濃度。

4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

試劑盒組成

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標板

12孔×8條

12孔×4條

標準品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2張

2張

說明書

1份

1份

自封袋

1個

1個

注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、7.5、15、30、60、120 pg/mL


小鼠白介素 ELISA試劑盒

試劑的準備

20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

洗板方法

1.  手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

2.  自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。


操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3.  樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。


試劑盒性能

1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。

2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL。

3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4. 重復性:板內、板間變異系數均小于15%。

5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

6. 有效期:6個月


免責聲明

1.  試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。

2.  嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔


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