HCT-8/V細(xì)胞- HCT-8/V耐藥株凍存

人結(jié)腸癌長春新堿耐藥株，HCT8 V細(xì)胞    
HCT8 V     貼壁上皮細(xì)胞
（2）客戶自備試劑
1）PBS
2）RPMI-1640培養(yǎng)基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗
3）0.25% （W/V）胰蛋白酶（含0.02% EDTA）
人結(jié)腸癌長春新堿耐藥株，HCT8 V細(xì)胞（3）細(xì)胞背景
1）生長方式：貼壁
2）種屬：Homo sapiens 人
（4）培養(yǎng)條件
1）培養(yǎng)基：RPMI-1640培養(yǎng)基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗
2）溫度：37.0°C
3）氣體:空氣 95%，CO2 5%
（5）培養(yǎng)方法
 收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細(xì)胞生長情況：
 如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
 如果細(xì)胞已長滿（達(dá)80-90%）。即可進(jìn)行傳代，具體步驟如下：
1）棄去培養(yǎng)液，用PBS洗1-2次。
2）向瓶內(nèi)加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細(xì)胞。
3）加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)
4）傳代比例：1:2-1:3
人結(jié)腸癌長春新堿耐藥株，HCT8 V細(xì)胞（6）常見問題及解決方案
1）培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。
2）細(xì)胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長至匯合度80%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決。
 

細(xì)胞分離、培養(yǎng)、鑒定：
（1）從中國正常人、中國病人、小鼠、大鼠、兔、豬、牛等等組織中對原代細(xì)胞進(jìn)行分離、培養(yǎng)、鑒定：我們將以客戶要求為標(biāo)準(zhǔn)，提供多種屬如中國正常人、中國病人、小鼠、大鼠、兔、豬、牛、其它動物原代細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、鑒定，并提供相應(yīng)的文件、資料、數(shù)據(jù)和檢測證書。對于人源性細(xì)胞，必要時，在許可的條件下，我們盡可能的滿足客戶所提供的要求。
（2）從建立實驗性疾病動物（小鼠、大鼠、兔）模型體內(nèi)組織中對人結(jié)腸癌長春新堿耐藥株，HCT8 V細(xì)胞進(jìn)行分離、培養(yǎng)、鑒定： 我們將以客戶要求，建立標(biāo)準(zhǔn)實驗性疾病動物模型，或客戶提供實驗性疾病動物模型，對原代細(xì)胞進(jìn)行分離、培養(yǎng)、鑒定，并提供相應(yīng)的文件、資料、數(shù)據(jù)和檢測證書。