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        COV434細胞,COV504細胞株的培養和傳代

        2017-02-23 瀏覽次數:1501

        COV434細胞,COV504細胞株的培養和傳代

        產品名稱:COV434細胞

        中文名稱:

        貨號:COV434

        規格:1~3*106細胞/25cm2培養瓶

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        用于檢測細胞因子的細胞株通常培養于含10%小牛血清和抗生素的培養液中,培養細胞因子依賴細胞株還有加入適量細胞因子。在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養,3~4天傳代一次。

        懸浮生長細胞的傳代:

        直接直接吸去或離心后吸去培養上清液,用新鮮培養液懸浮細胞,1:3或1:5稀釋細胞后,分瓶繼續培養。

        帖壁生長細胞的傳代:

        吸去培養液,用PBS洗滌細胞一次,加入消化液,在37℃中消化約3~10分鐘,待細胞開始脫落時,倒去消化液,加入新鮮培養液,懸浮和吹打分散細胞。也可以待細胞*消化脫落,500×g離心5分鐘,去除消化液,用新鮮培養液懸浮細胞。1:3或1:5稀釋細胞后,分瓶繼續培養。

        2、細胞株的凍存:

        (1)取培養2~3天生長旺盛的細胞,用細胞培養液將細胞配成2×106~2×107/ml。

        (2)在1ml細胞凍存管中加入0.5ml細胞懸液,0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亞砜(或甘油),混勻后密封。置4℃ 1小時,-20℃ 2小時,然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上隔日后浸入液氮中。

        3、細胞株的復蘇:

        復蘇時,從液氮中取出凍存管,立即置37℃水浴中融化細胞。將細胞直接加入10ml含15%小牛血清的RPMI-1640培養液中,置37℃ 5%CO2飽和水汽二氧化碳培養箱中培養。懸浮細胞待細胞全部沉降后小心吸去上清液,更換新鮮的上述培養液,繼續培養;帖壁細胞則培養2~3實驗。

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