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        ECL化學化學發光底物(超敏)的操作步驟

        2023-03-22 瀏覽次數:886

        ECL化學化學發光底物(超敏)可為使用辣根過氧化物酶(HRP)偶聯物的免疫印跡實驗提供明亮的信號和低皮克級檢測靈敏度。 該ECL底物能夠兼容各種膜、封閉液和寬范圍抗體稀釋液,以出色性能、通用性和高性價比,滿足用戶的免疫印跡應用需求。

        操作步驟:
        1、執行常規SDS-PAGE、轉模和Western Blot步驟。 注意用HRP標記lgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾法。
        2、Western Blot最后一次洗模的同時配置發光工作液:分別取等體積的A液和B液,放入干凈容器中混合(注意吸取A液和B液的吸頭一定要分開,避免試劑污染)。 建議立即使用工作液,室溫放置數小時后仍可使用但靈敏度有所降低。
        3、Western Blot最后一次洗膜后,用鑷子將膜取出,用濾紙吸去多余的洗滌液(切勿接觸膜的蛋白面),然后置于一潔凈保鮮膜上或塑料容器內。
        4、根據膜的大小按比例滴加配置好的ECL工作液到膜上,確保工作液均勻覆蓋在膜上,放置1-3分鐘。
        5、取膜,用濾紙吸去多余的液體,將膜放在兩篇保鮮膜中間,隨后進行壓片檢測或化學發光成像儀檢測。
        6、壓片檢測:將膜固定于X光膠片暗盒內(注意蛋白面向上)。 暗房內壓X光膠片,分別曝光不同的時間,如數秒到數分鐘,顯影沖洗。
        7、化學發光成像儀檢測:將膜放置到化學發光成像儀內,參考儀器說明書進行檢測。

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