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細胞培養生長減慢和死亡的原因

2022-11-07 瀏覽次數:2363

培養細胞生長減慢這種情況可能的原因包括:

1.由于更換了不同培養液或血清,細胞需要重新適應。

2.試劑保存不當,培養液中一些細胞生長必需成分如谷氨酰胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。

3.培養物中有少量細菌或真菌污染。

4.接種細胞起始濃度太低。

5.細胞已老化。

6.支原體污染。

建議解決方法:

1.比較新培養液與原培養液成分,比較新血清與舊血清支持細胞生長實驗。讓細胞逐漸適應新培養液。

2換入新鮮配制培養液,或補加谷氨酰胺及生長因子。

3.用無抗生素培養液培養,如發現污染,更換培養物。

4.培養液需在2-8℃避光保存。含血清培養液在2-8℃保存,并在2周內用完。

5.增加接種細胞起始濃度。

6.換用新的保種細胞。

7.隔離培養物,檢測支原體。清潔支架和培養箱。如發現支原體污染,更換新的培養物。

培養細胞死亡的原因:

常見的可能原因是細胞傳代時,消化過度,細胞嚴重受傷。如經驗不足,細胞傳代消化時,在顯微鏡下觀察,至細胞變圓、脫壁,加入含血清的培養液,終止消化。其他原因包括長途運輸,細胞在不適宜的溫度下時間過長;培養液中營養成分消耗殆盡,沒有及時換液。如果原來細胞狀態較好,換液后細胞死亡,應考慮是培養液及血清的質量。-好事先已證明培養液及血清質量良好。

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