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        動(dòng)物血清的正確熱滅活方法

        2022-09-28 瀏覽次數(shù):1063

        動(dòng)物血清的熱滅活非常容易造成蛋白析出增多,若非必要,可以無需做此操作。若必須做動(dòng)物血清的熱滅活,請嚴(yán)格遵守以下步驟:

        1、保證血清*融化狀態(tài),溫度接近常溫。

        2、保證水浴溫度56℃、30分鐘的原則,在水浴過程中每隔2-3分鐘搖晃瓶子,使血清內(nèi)部受熱均勻,直至滅活時(shí)間結(jié)束。

        注意事項(xiàng):

        溫度過高、時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多,甚至嚴(yán)重影響血清的品質(zhì)。在56℃水浴中,持續(xù)恒溫30分鐘。在此過程中每隔2-3分鐘搖晃瓶子,使其受熱均勻,減少蛋白的析出。

        為什么要熱滅活血清?

        加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活血清。

        實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是小黑點(diǎn),常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。若非必須,可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量!

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