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技術(shù)文章 / article
143B細(xì)胞人骨肉瘤細(xì)胞
2020-06-08 瀏覽次數(shù)：1356
143B細(xì)胞人骨肉瘤細(xì)胞
細(xì)胞名稱(chēng) | 143B 人骨肉瘤細(xì)胞 |
貨號(hào) | H002 |
種屬 | 人 |
細(xì)胞來(lái)源 | 從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進(jìn) |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 上皮樣 |
培養(yǎng)條件 | 培養(yǎng)基：90%DMEM(H)+10%FBS 溫度：37℃ 氣相：95%空氣，5%二氧化碳 |
傳代 | 1.用75%酒精噴灑整個(gè)培養(yǎng)瓶消毒，將其平躺置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行1-3小時(shí)的緩沖，.然后置于無(wú)菌操作臺(tái)，打開(kāi)瓶口，將其中的培養(yǎng)液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基(以T25培養(yǎng)瓶為例)并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況及培養(yǎng)基顏色變化對(duì)其進(jìn)行換液以及傳代，一般2到3天換一次液； 2.待細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)瓶底面積80%-90%，需要對(duì)其進(jìn)行傳代，傳代比例為1:3到1:6； 3傳代步驟：將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°預(yù)熱，倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，往培養(yǎng)瓶中加入3-5 ml PBS，輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1-2 ml預(yù)熱好的胰酶，置于37°孵育消化（第D一次消化需時(shí)常取出置于顯微鏡下觀察，以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見(jiàn)細(xì)胞脫落為D佳消化時(shí)間，記錄D佳消化時(shí)間，以便于下次消化），消化好后加入3ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落，然后收集細(xì)胞懸液，1200rpm離心3min，棄上清，加入*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，進(jìn)行傳代。 |
保存 | 凍存條件：80%*培養(yǎng)基+10%FBS+10%DMSO (備注：建議使用本公司的冷凍液（H-W-100），用4度保存的冷凍液直接重懸細(xì)胞，不能預(yù)熱后使用。) 保存條件：液氮存儲(chǔ) |
供應(yīng)限制 | 經(jīng)供研究之用 |
常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案 | 1.培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會(huì)污染，所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。 2.收到細(xì)胞后盡快更換為含 10%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加 10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間長(zhǎng)不宜超過(guò) 72 小時(shí)） 3.細(xì)胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開(kāi)封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。1-2小時(shí)后觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉，留8-10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo)，直到問(wèn)題解決。 |
143B細(xì)胞人骨肉瘤細(xì)胞
常見(jiàn)熱賣(mài)細(xì)胞：
HeLa 人宮頸癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
143B 人骨肉瘤細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
293T 人胚腎細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
A2780 人卵巢癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
A549 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
A673 人尤因肉瘤細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 多邊形
AGS 人胃腺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
BGC823 人胃腺癌細(xì)胞(低分化) RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
C33A 人宮頸癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
CACO2 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 DMEM+20% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
COLO205 人結(jié)腸癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 半懸浮 上皮細(xì)胞樣
DU145 人前列腺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
ES-2 人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞 McCoy's 5A+10%FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
H1650 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
H460 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
HACAT 人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞 DMEM+15% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
HCT116 人結(jié)腸癌細(xì)胞 McCoy's 5A+10%FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
HEK293 人胚腎細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
HEPG2 人肝癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
HGC27 人胃癌細(xì)胞(未分化) DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
HT-29 人結(jié)腸癌細(xì)胞 McCoy's 5A+10%FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
HUVEC 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 ECM 貼壁 上皮細(xì)胞樣
KYSE150 人食道癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
L02(HL7702)(QSG-7701) 人正常肝細(xì)胞 RPMI-1640+20% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
LOVO 人結(jié)腸癌細(xì)胞 F12K+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
MCF-10A 人正常乳腺上皮細(xì)胞 DMEM/F12(1:1) 培養(yǎng)基+胰島素(10ug/ml)+表皮生長(zhǎng)因子(20ng/ml)+100ng/ml霍亂病毒+0.5ug/ml氫d化d可d的d松+5% 馬血清 貼壁 上皮細(xì)胞樣
MCF7 人乳腺癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素 貼壁 上皮細(xì)胞樣
LX-2 人肝星狀細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
MDA-MB-468 人乳腺癌細(xì)胞 L-15+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣
MIA Paca2 人胰腺癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣 少量圓形懸浮
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