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技術(shù)文章 / article
RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)分享★CQ★
2018-05-07 瀏覽次數(shù)：3088
RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)分享★CQ★
★CQ★上海蒂科生物專(zhuān)注生物科研試劑：胎牛血清（HAKATA、Hylone、SERANA、NTC、Corning、BOVOGEN、PAA、SIGMA等），無(wú)外泌體血清(SBI)，ELISA試劑盒（HAKATA自主品牌、進(jìn)口），2萬(wàn)多株細(xì)胞（含400多種類(lèi)通過(guò)STR鑒定），培養(yǎng)基（干粉、液體），雙抗，胰酶，sigma試劑等，本公司供應(yīng)原裝胎牛血清，*的服務(wù)、真誠(chéng)的態(tài)度、堅(jiān)持以質(zhì)取勝，做您的實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家。;。
★CQ★raw264.7細(xì)胞是一種鼠源的巨噬細(xì)胞系，raw264.7細(xì)胞貼壁快，形態(tài)以類(lèi)圓形和不規(guī)則為主，一般1～2個(gè)核，極少數(shù)有3個(gè)核，胞漿伸展時(shí)胞體較大。細(xì)胞貼壁緊，難以消化，需要多次吹打消化，采用細(xì)胞刮法。
★CQ★raw264.7細(xì)胞復(fù)蘇：
將液氮中細(xì)胞直接放入37℃左右水浴中快速解凍，后加入5倍體積培養(yǎng)基，800rpm離心3min，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。成功率基本上99.9%
★CQ★raw264.7細(xì)胞培養(yǎng)：
1）培養(yǎng)條件：1640+10%FBS、5%CO2、37°C；
2）這細(xì)胞對(duì)刺激很敏感，不用胰酶消化，盡量不用雙抗；傳代的時(shí)候盡量吹散，防止扎堆，也不能吹太過(guò)，吹太過(guò)，細(xì)胞會(huì)受到刺激易張觸角；
3）raw264.7細(xì)胞對(duì)PH也比較敏感，偏堿性的時(shí)候容易扎堆，培養(yǎng)基用久了偏堿性的時(shí)候要注意調(diào)一下；
4）細(xì)胞生長(zhǎng)較快，建議一天傳一次代。
★CQ★raw264.7細(xì)胞凍存：
凍存液為50%血清，10%DMSO，40%培養(yǎng)基，放入凍存盒后4℃、30min，直接轉(zhuǎn)入-80℃，過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮。
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