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技術(shù)文章 / article
胎牛血清出現(xiàn)黑點(diǎn)原因分析及如何預(yù)防
2017-10-10 瀏覽次數(shù)：1632
胎牛血清細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?又該如何處理?
一旦您在胎牛血清細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動。如果細(xì)胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。
如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：
1、細(xì)血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的結(jié)果;
2、配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格。可應(yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn);
3、配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長;
4、胞生長過老，破碎的細(xì)胞殘骸;
5、培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。
胎牛血清細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成?
1、培養(yǎng)基保持*PH值7.0-7.2。
2、培養(yǎng)基無需37℃水浴。
3、盡可能地減少血清凍融次數(shù)。
4、嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗。
5、掌握細(xì)胞傳代的*時(shí)機(jī)，細(xì)胞切勿生長過老。
一旦您在胎牛血清細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動。如果細(xì)胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。
如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：
1、細(xì)血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的結(jié)果;
2、配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格。可應(yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn);
3、配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長;
4、胞生長過老，破碎的細(xì)胞殘骸;
5、培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。
胎牛血清細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成?
1、培養(yǎng)基保持*PH值7.0-7.2。
2、培養(yǎng)基無需37℃水浴。
3、盡可能地減少血清凍融次數(shù)。
4、嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗。
5、掌握細(xì)胞傳代的*時(shí)機(jī)，細(xì)胞切勿生長過老。
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